מיקרוסקופיה פלואורסצנטית חוללה מהפכה ביכולת שלנו להמחיש ולחקור דגימות ביולוגיות, ומאפשרת לנו להתעמק בעולם המורכב של תאים ומולקולות. מרכיב מרכזי במיקרוסקופ פלואורסצנטי הוא מקור האור המשמש לעורר מולקולות פלואורסצנטיות בתוך המדגם. במהלך השנים הופעלו מקורות אור שונים, כל אחד עם מאפייניו ויתרונותיו הייחודיים.
1. מנורת כספית
מנורת הכספית בלחץ גבוה, הנעה בין 50 ל-200 וואט, בנויה באמצעות זכוכית קוורץ וצורתה כדורית. הוא מכיל בתוכו כמות מסוימת של כספית. כאשר הוא פועל, מתרחשת פריקה בין שתי אלקטרודות, הגורמת לכספית להתאדות, והלחץ הפנימי בכדור עולה במהירות. תהליך זה אורך בדרך כלל כ-5 עד 15 דקות.
פליטת מנורת הכספית בלחץ גבוה נובעת מהתפוררות והפחתה של מולקולות כספית במהלך פריקת האלקטרודה, מה שמוביל לפליטת פוטוני אור.
הוא פולט אור אולטרה סגול וכחול סגול חזק, מה שהופך אותו למתאים לחומרים פלורסנטים שונים ומלהיבים, וזו הסיבה שהוא נמצא בשימוש נרחב במיקרוסקופ פלואורסצנטי.
2. מנורות קסנון
מקור אור לבן נוסף בשימוש נפוץ במיקרוסקופ פלואורסצנטי הוא מנורת הקסנון. מנורות קסנון, כמו מנורות כספית, מספקות ספקטרום רחב של אורכי גל מאולטרה סגול ועד לאינפרא אדום. עם זאת, הם שונים בספקטרום העירור שלהם.
מנורות כספית מרכזות את פליטתן באזורים כמעט אולטרה סגולים, כחולים וירוקים, מה שמבטיח יצירת אותות פלורסנט בהירים אך מגיע עם פוטו-רעילות חזקה. כתוצאה מכך, מנורות HBO שמורות בדרך כלל לדגימות קבועות או להדמיית פלואורסצנציה חלשה. לעומת זאת, למקורות מנורות קסנון יש פרופיל עירור חלק יותר, המאפשר השוואת עוצמה באורכי גל שונים. מאפיין זה הוא יתרון עבור יישומים כמו מדידות ריכוז יוני סידן. מנורות קסנון מפגינות גם עירור חזק בטווח הקרוב לאינפרא אדום, במיוחד סביב 800-1000 ננומטר.
למנורות XBO יש את היתרונות הבאים על פני מנורות HBO:
① עוצמה ספקטרלית אחידה יותר
② עוצמה ספקטרלית חזקה יותר באזורי האינפרא אדום ואמצע האינפרא אדום
③ תפוקת אנרגיה גדולה יותר, מה שמקל על הגעה לצמצם של המטרה.
3. לדים
בשנים האחרונות צץ מתמודד חדש בתחום מקורות האור במיקרוסקופ פלואורסצנטי: לדים. נוריות LED מציעות את היתרון של הפעלה מהירה לכיבוי במילישניות, צמצום זמני חשיפה לדגימות והארכת תוחלת החיים של דגימות עדינות. יתר על כן, אור LED מפגין דעיכה מהירה ומדויקת, ומפחיתה משמעותית את הפוטוטוקסיות במהלך ניסויים ארוכי טווח בתאים חיים.
בהשוואה למקורות אור לבן, נוריות LED בדרך כלל פולטות בתוך ספקטרום עירור צר יותר. עם זאת, רצועות LED מרובות זמינות, המאפשרות יישומי פלואורסצנטי רב-צבעי רב-תכליתי, מה שהופך את נוריות ה-LED לבחירה פופולרית יותר ויותר במערכות מודרניות של מיקרוסקופ פלואורסצנטי.
4. מקור אור לייזרים
מקורות אור לייזר הם מונוכרומטיים וכיווניים ביותר, מה שהופך אותם לאידיאליים עבור מיקרוסקופיה ברזולוציה גבוהה, כולל טכניקות סופר-רזולוציה כגון STED (Depletion Stimulated Emission) ו-PALM (Photoactivated Localization Microscopy). אור לייזר נבחר בדרך כלל כדי להתאים את אורך גל העירור הספציפי הנדרש עבור הפלואורפור היעד, המספק סלקטיביות ודיוק גבוהים בעירור הקרינה.
הבחירה במקור אור למיקרוסקופ פלואורסצנטי תלויה בדרישות הניסוי הספציפיות ובמאפייני המדגם. אנא אל תהסס לפנות אלינו אם אתה צריך עזרה כלשהי
זמן פרסום: 13 בספטמבר 2023