שיטת התצפית בשדה הבהיר ושיטת התצפית בשדה האפל הן שתי טכניקות מיקרוסקופיה נפוצות, להן יישומים ויתרונות שונים בסוגים שונים של תצפית מדגמית. להלן הסבר מפורט על שתי שיטות התצפית.
שיטת תצפית בשדה בהיר:
שיטת התצפית בשדה הבהיר היא אחת מטכניקות המיקרוסקופיה הבסיסיות והנפוצות ביותר. בתצפית בשדה בהיר, הדגימה מוארת באור משודר, והתמונה נוצרת על סמך עוצמת האור המשודר. שיטה זו מתאימה לדגימות ביולוגיות שגרתיות רבות, כגון פרוסות רקמה מוכתמות או תאים.
יתרונות:
קל לתפעול וישים למגוון רחב של דגימות ביולוגיות ואי-אורגניות.
מספק תצוגה ברורה של המבנה הכללי של דגימות ביולוגיות.
חסרונות:
לא מתאים לדוגמאות שקופות וחסרות צבע, מכיוון שלעתים קרובות אין להן ניגודיות, מה שהופך את זה למאתגר להשיג תמונות ברורות.
לא מסוגל לחשוף מבנים פנימיים עדינים בתוך תאים.
שיטת תצפית בשדה אפל:
תצפית בשדה כהה משתמשת בסידור תאורה מיוחד כדי ליצור רקע כהה סביב הדוגמה. זה גורם לדוגמא להתפזר או להחזיר אור, וכתוצאה מכך תמונה בהירה על הרקע הכהה. שיטה זו מתאימה במיוחד לדגימות שקופות וחסרות צבע, מכיוון שהיא משפרת את הקצוות וקווי המתאר של הדוגמה, ובכך מגבירה את הניגודיות.
אביזר מיוחד הנדרש לתצפית בשדה חשוך הוא מעבה שדה כהה. הוא מאופיין בכך שלא נותנת לאלומת האור לעבור את האובייקט הנבדק מלמטה למעלה, אלא משנה את נתיב האור כך שהוא נוטה לכיוון האובייקט הנבדק, כך שאור התאורה לא ייכנס ישירות לעדשת האובייקט. ומשתמשים בתמונה הבהירה שנוצרה על ידי אור השתקפות או עקיפה על פני האובייקט הנבדק. הרזולוציה של תצפית בשדה כהה גבוהה בהרבה מזו של תצפית בשדה בהיר, עד 0.02-0.004 מיקרומטר.
יתרונות:
מתאים לצפייה בדגימות שקופות וחסרות צבע, כגון תאים חיים.
משפר את הקצוות והמבנים העדינים של המדגם, ובכך מגדיל את הניגודיות.
חסרונות:
דורש התקנה מורכבת יותר וציוד ספציפי.
כולל התאמת המיקום של המדגם ומקור האור לתוצאות מיטביות.
זמן פרסום: 24 באוגוסט 2023